菲羅門色譜柱的周期性保養(yǎng)流程

更新時(shí)間：2025-08-15

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　　菲羅門色譜柱的維護(hù)對(duì)于延長其使用壽命、保持分離效果和確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性至關(guān)重要。以下是系統(tǒng)化的維護(hù)策略及具體操作步驟：

　　一、菲羅門色譜柱流動(dòng)相預(yù)處理要點(diǎn)

　　1.過濾凈化不可少

　　所有溶劑必須經(jīng)過0.22μm濾膜過濾，建議使用帶預(yù)過濾器的保護(hù)裝置進(jìn)行在線過濾；

　　水相流動(dòng)相應(yīng)脫氣處理（超聲震蕩或在線脫氣機(jī)），避免溶解氧導(dǎo)致填料氧化降解。

　　2.pH值嚴(yán)格控制

　　常規(guī)C18/C8柱建議保持pH范圍2-8；若使用極*pH條件，須選用專用耐酸堿填料；

　　緩沖鹽濃度不超過50mM以防止鹽析出結(jié)晶堵塞管路。

　　3.避免顆粒物沖擊

　　樣品溶液需先經(jīng)針筒過濾器過濾后再進(jìn)樣；

　　禁止直接注射渾濁溶液或含懸浮物的復(fù)雜基質(zhì)。

　　二、菲羅門色譜柱周期性保養(yǎng)流程

　　1.基礎(chǔ)沖洗程序（每月一次）

　　反向沖洗再生法

　　切換為高比例強(qiáng)溶劑，以正常流速反向沖洗60分鐘；

　　此操作可有效去除累積的弱保留雜質(zhì)，恢復(fù)柱效達(dá)初始值的95%以上。

　　過渡梯度平衡

　　完成分析后繼續(xù)運(yùn)行5%~10%梯度增量直至基線平穩(wěn)，防止不同批次間交叉污染。

　　保存溶劑置換

　　長期閑置時(shí)改用同比例混合的甲醇/乙腈溶液保存，每周更換新鮮溶劑防止微生物滋生。

　　2.深度清潔方案（每季度實(shí)施）

　　針對(duì)嚴(yán)重污染情況可采用分段式清洗策略：

　　脂溶性污染物清除

　　依次用正己烷→異丙醇→二氯甲烷各沖洗30分鐘，中間穿插空白運(yùn)行檢測(cè)殘留；

　　注意：避免使用氯仿等強(qiáng)鹵代烴類溶劑以免損傷封端鍵合相。

　　離子型殘留分解

　　配制含0.1%三氟乙*的乙腈溶液，低流速循環(huán)清洗2小時(shí)；

　　后續(xù)用pH7緩沖液中和至中性后再過渡回常規(guī)流動(dòng)相。

　　生物活性物質(zhì)滅活

　　對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)合導(dǎo)致的失活現(xiàn)象，可用含0.05%疊氮鈉的磷酸鹽緩沖液浸泡過夜。