SPE固相萃取小柱作用機理解讀

更新時間：2025-12-10

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　　SPE固相萃取小柱的作用機理基于液-固相色譜理論，通過選擇性吸附與選擇性洗脫實現(xiàn)目標物的分離、純化和富集，其核心原理及關(guān)鍵步驟如下：

　　一、SPE固相萃取小柱核心作用機理

　　1.選擇性吸附

　　當復(fù)雜樣品溶液通過SPE小柱時，吸附劑（如硅膠鍵合相、聚合物等）通過極性相互作用、疏水作用、離子交換或螯合作用等，選擇性保留目標化合物及少量性質(zhì)相近的組分，而其他雜質(zhì)則隨流動相（樣品基質(zhì)）流出小柱。

　　示例：在反相萃取中，非極性吸附劑（如C18）會優(yōu)先吸附非極性目標物（如藥物分子），而極性雜質(zhì)（如糖類、無機鹽）則直接穿透。

　　2.選擇性洗脫

　　通過調(diào)整洗脫溶劑的極性、pH或離子強度，打斷目標物與吸附劑之間的相互作用力，使其從吸附劑上解吸并隨洗脫液流出，實現(xiàn)目標物與殘留雜質(zhì)的分離。

　　二、SPE固相萃取小柱關(guān)鍵步驟與影響因素

　　1.活化（Activation）

　　目的：使吸附劑表面官能團充分展開，并去除可能存在的干擾物質(zhì)。

　　方法：反相柱常用甲醇潤濕，正相柱用非極性溶劑（如正己烷）處理。

　　影響：活化不足可能導(dǎo)致吸附效率下降，活化過度可能破壞吸附劑結(jié)構(gòu)。

　　2.上樣（Loading）

　　目的：將樣品溶液通過SPE柱，使目標物被吸附劑保留。

　　條件：需控制樣品溶劑的極性。例如，反相萃取中樣品應(yīng)溶于水或低比例有機溶劑，以避免目標物直接穿透。

　　風(fēng)險：若樣品基質(zhì)復(fù)雜（如含大量蛋白質(zhì)或顆粒物），可能堵塞篩板或競爭吸附位點，導(dǎo)致回收率降低。

　　3.淋洗（Washing）

　　目的：去除與目標物性質(zhì)相近的干擾雜質(zhì)，同時避免目標物損失。

　　方法：選擇與上樣溶劑極性相近但洗脫強度稍強的溶劑。例如，反相柱可用5%甲醇-水沖洗。

　　平衡點：需在凈化效果與回收率間找到優(yōu)解，避免過度淋洗導(dǎo)致目標物流失。

　　4.洗脫（Elution）

　　目的：用強洗脫溶劑將目標物從吸附劑上解吸并收集。

　　方法：洗脫溶劑的極性應(yīng)與目標物-吸附劑相互作用力匹配。例如，反相柱常用100%甲醇或乙腈洗脫。

　　優(yōu)化：可通過梯度洗脫或分步洗脫提高選擇性，減少雜質(zhì)共洗脫。